茶多酚提取物EGCG对人皮肤成纤维细胞自然老化及慢性光损伤的影响
目的 观察表没食子儿荼素没食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)对正常生理代谢状态下人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)自然老化以及经长、中波紫外线(UVA及UVB)多次辐射后HSF光损伤的影响。方法 分离新生儿包皮获得原代HSF,将其分为正常生理代谢传代实验组(A组)和多次UV照射实验组(B组)。预实验选定EGCG有效作用质量浓度25mg·L^-1。A组细胞包括加入EGCG干预组和空白对照组,共孵育80d。B组HSF细胞分组包括:空白对照组、EGCG干预组、多次UVA组、多次UVA4-EGCG组、多次UVB组及多次UVB4-EGCG组,其中UVA和UVB均采用文献提示日常生理剂量,每天照射,持续照射2周。采用组织化学染色法检测细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶的表达量,观察细胞自然老化及照光后的老化情况;采用流式细胞仪测定细胞周期及细胞凋亡率。结果 A组中,EGCG组的β-半乳糖苷酶阳性细胞数较正常对照组下降了47.60%(P〈0.05)。B组中正常细胞组及EGCG组均只见少量的β-半乳糖苷酶阳性细胞。其余几组阳性细胞比率为:多次UVB组〈多次UVA组〈EGCG4-多次UVB组〈EGCG4-多次UVA组,4组细胞间阳性比率差异均有统计学意义(P〈0.05)。日常剂量UV多次辐射后可上调HSF的凋亡率,经EGCG处理的两组细胞凋亡率与单纯UVB组和单纯UVA组比较分别增加了87.08%和56.92%。结论 EGCG可减缓生理代谢状态下的HSF老化;EGCG可进一步增加UV多次辐射后的细胞老化及细胞凋亡,此可能是EGCG减轻自然老化去除多次光损伤不同机制所致。
完成机构:[1]南京医科大学第一附属医院皮肤科,南京210029 [2]江苏省中医院皮肤科,南京210029
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